生产无籽西瓜的方法--组织培养法

组织培养法 

组织培养就是利用植物的某一部分组织或器官在无菌条件下，培养成完整植株的一种新的繁殖方法。我国从1979年即开始开展此项工作，目前上海、北京、山东、河北、山西、甘肃及黑龙江等省市的许多单位已利用该法生产出大批优质高产的无籽西瓜供应市场，取得显著的经济效益和社会效益。具体方法是： 

（1）培养材料：据国内外报道，西瓜的种胚、茎尖、根尖、花粉及子房等均可用于组织培养，但目前应用最多的是种胚和茎尖组织培养。

（2）培养基：西瓜组织培养的培养基因所选用的材料及培养阶段的不同异。一般可分为芽团分化培养基、种胚培养基和生根培养基等三种。

 ①西瓜芽团培养基：每升培养基中有大量元素硝酸铵（NH4NO3）500毫克，硝酸钾（KNO3）1000毫克，氯化钙（CaC12）440毫克，硫酸镁（MgSO4·7H2O）370毫克，磷酸二氢钾（ KH2PO4）370毫克，铁盐EDTA-Na2）745毫克；有微量元素硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）55.7 克，硫酸锰（MnSO4·4H2O）22.3毫克，硼酸（H3BO3）6.2毫克，碘化钾（KI）0.83毫克，钼酸钠（ Na2MoO4·2H2O）0.25毫克，硫酸锌（ZnSO4·7H2O）8.6毫克，硫酸铜（CuSO4·5H2O）0.025毫克，氯化钴（CoC12·6H2O）0.025毫克；含有机物肌醇100毫克，维生素B10.4毫克，维生素B60.5毫克，甘氨酸2毫克，烟酸0.5毫克；含激素吲哚乙酸（IAA）1毫克，6-苄基嘌呤（6-BA）0.5毫克；含琼脂7克，蔗糖30克或食用白糖50克。pH调至5.5～6.4。

 ②西瓜种胚培养基：大量元素、微量元素、维生素及有机物等全部与①同，但激素类去掉吲哚乙酸（IAA）和6-苄基嘌呤（6-BA）。蔗糖改为每升20克（食用白糖33.3克）。pH调为6～6.4。 ③西瓜生根培养基：除将①中的激素6-苄基嘌呤和吲哚乙酸去掉，换用吲哚丁酸（IBA）1毫克，其余各类元素与①完全相同。

（3）培养方法：首先对培养材料进行消毒处理。如果取材为种子时，先用70～80℃温水浸种，搅拌至30℃左右，浸泡一昼夜，然后用75%的酒精消毒30秒钟，在无菌条件下剥去种皮，用0.1%的开汞消毒2分钟，再用无菌水冲洗4～5次，接种于培养基上，放入培养室培养。胚根首先萌发，2周后当2片子叶展开转绿时，将带子叶的胚芽切下，进行转移培养。以后每隔3～4周切割一次，将顶芽和侧芽分离，再行继代培养。 如果从田间三倍体西瓜苗上直接取茎尖或侧芽时，应先将取来的材料用自来水冲洗干净，再用75%的酒精消毒10秒钟，然后用0.1%的升汞消毒2钟，最后用无菌水冲洗4～5次，接种于培养基上，放入培养室培养。 

（4）培养基和培养条件：所用的基本培养基为M5和1/2MS，根据对幼苗分化，生长以及生根等不同环节的具体要求，分别附加不同的激素，再加3%的蔗糖，0.7%的琼脂，调整pH值为5.8。在 1公斤/厘米2压力下高温灭菌20分钟，然后进行接种，再将接种好的外植体放在温度为26±1℃、光强1000勒克司、光照14小时/日的培养室中培养。 

（5）嫁接及管理：将组织培养增生的芽苗，可直接培育为成苗用于生产，也可用于嫁接培育成嫁接苗用于生产，以后者为好。若培育嫁接苗，在嫁接之前，需将分化的芽苗加高。方法是，将芽苗转移到不含激动素的MS+IBA0.5～1.0+GA0.5生根培养基中，使芽苗的基部逐渐生根，伴随根的生长，幼茎迅速加高，发育健壮，提高了接穗的质量。嫁接所用的砧木播种在盛有普通土壤的塑料营养钵中，待砧木子叶展开，微露真叶时，切除砧木顶芽进行嫁接。砧木的选择及嫁接操作方法参阅“嫁接栽培”部分。嫁接后立即转入愈合棚中愈合，棚内温度25～35℃，相对湿度95%以上，在此条件下，嫁接苗一般10天左右即可愈合，然后转移到温室中，锻炼3～4天。此期应注意透风，使之逐渐增强适应性。最后移栽到大田。田间栽培管理措施与无籽西瓜栽培管理措施相似，可参照执行。